1.色譜柱信息

  WondaSil C18-WR液相色譜柱是在新型高純度球狀硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基的反相分離模式色譜柱，適合用于弱極性至中等極性例如合成藥物、中藥、多肽、有機(jī)酸等的分離。WondaSilC18-WR液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成，到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測(cè)，都是在本公司嚴(yán)格的產(chǎn)品控制下進(jìn)行，因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性；通過(guò)獨(dú)有的裝填技術(shù)填裝的色譜柱柱床密度均一穩(wěn)定，從而確保色具有高柱效，硅膠粒徑分布均勻，確保柱壓極低。

  WondaSilC18-WR液相色譜柱采用改性硅膠基體，惰性化程度很高，端基封尾徹底，即使是酸性和堿性或者金屬配位性化合物化合物分析，也能保持良好的峰型，可以用于方法開(kāi)發(fā)中反相ODS柱的首選色譜柱。

  為了能長(zhǎng)期保持WondaSilC18-WR液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱，在使用色譜柱之前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

2.使用前的檢查與須知事項(xiàng)

●檢查包裝箱的外觀有無(wú)異常。

●打開(kāi)包裝，檢查色譜柱的填料名稱、尺寸規(guī)格、連接形式是否相符。

●色譜柱中封存流動(dòng)相為乙腈/水或者甲醇/水的混合物，具體比例請(qǐng)參考柱效報(bào)告。

3.色譜柱填料規(guī)格

4.色譜柱安裝與操作

  色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中，兩端用堵頭密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí)，首先請(qǐng)確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶，請(qǐng)采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行充分過(guò)渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中，并注意流動(dòng)相的方向要與柱上標(biāo)記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標(biāo)準(zhǔn)接頭形式為1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖)。

  色譜柱連接好之后，請(qǐng)確認(rèn)無(wú)漏液現(xiàn)象之后再進(jìn)行后續(xù)操作。

  新的WondaSilC18-WR柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中，在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，硅膠填料可能會(huì)干涸，推薦用純的甲醇或乙腈沖洗10~20倍柱體積對(duì)色譜柱進(jìn)行活化，流速?gòu)?/span>0.1mL/min緩慢上升到最佳流速。(如果在活化過(guò)程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線不正常時(shí)，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我公司工程師處理。)然后再用不含緩沖鹽的流動(dòng)相進(jìn)行平衡20倍柱體積，再用

流動(dòng)相平衡，待壓力和基線穩(wěn)定之后，再進(jìn)樣分析。

5.樣品與流動(dòng)相

  為避免色譜柱堵塞，所有樣品及溶劑，包括緩沖溶液在內(nèi)，在使用前必須用0.45μm或者0.22 μm的濾膜過(guò)濾。WondaSilC18-WR色譜柱耐純水能力強(qiáng)，可以使用純水或者純的緩沖鹽水溶液作為流動(dòng)相。

6.色譜柱的保養(yǎng)

●pH WondaSil C18-WR色譜柱可在pH1~10范圍內(nèi)使用，為保持色譜柱良好的壽命，請(qǐng)避免較強(qiáng)的酸或堿性樣品或者流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。

●耐壓常規(guī)色譜柱耐受壓力為20MPa，HP系列耐壓為50MPa，UHPLC系列耐受80MPa，但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)對(duì)色譜柱造成難以修復(fù)的損害，因此系統(tǒng)壓力升高之后，建議盡快排查系統(tǒng)，如果是色譜柱壓力升高，請(qǐng)及時(shí)采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱。

●溫度 最高操作溫度為60℃，長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作會(huì)顯著降低色譜柱壽命。

●沖洗

1.新柱平衡：新柱是保存在高比例的有機(jī)溶劑中，建議先采用色譜柱保存流動(dòng)相平衡色譜柱一段時(shí)間，觀察基線和壓力是否正常，然后再通入流動(dòng)相。

如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑，直接用流動(dòng)相平衡即可；如果流動(dòng)相使用緩沖鹽，先要用高比例的水相充分過(guò)渡20倍柱體積，然后進(jìn)行流動(dòng)相平衡。

2.使用完畢后的清洗、保存及再使用時(shí)流動(dòng)相的過(guò)渡：

①使用完畢后，先用高比例的水相進(jìn)行沖洗約20倍柱體積。

②如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑，上述①完畢后，用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積，然后此條件下進(jìn)行保存，再使用時(shí)直接沖流動(dòng)相即可。

③如果流動(dòng)相中使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑，上述①完畢后，用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積，然后此條件下進(jìn)行保存，再使用時(shí)請(qǐng)務(wù)必用高比例的水相充分過(guò)渡20倍柱體積，再通入流動(dòng)相。

●儲(chǔ)存 色譜柱長(zhǎng)期不用，建議日常沖洗方法完成之后，再用純乙腈或者甲醇沖洗20倍柱體積，然后保存在該流動(dòng)相條件下，之后卸掉色譜柱，兩端用堵頭密封，并放在溫度變化小的場(chǎng)所。